石蜡切片
我们先来说说石蜡切片怎么做。组织包埋进石蜡以后，做好的组织蜡块常温保存即可。但是如果你们实验室冰箱很空，放冰箱也可以。不过呢，蜡块如果放冰箱倒真是有个很实用的功能，就是切出来的切片不容易裂（等下我们来讨论原因），所以如果蜡块事先一直是常温保存的，在切片之前，最好也提前1-2h放入4℃预冷。预冷的这段时间，可以先做好准备工作：
1、打开漂片机，温度调至40℃。做石蜡切片除了切片机以外还需要另一种仪器，那就是漂片机了。漂片机主要有两个功能，一个是用温水把切片铺展、铺平，便于贴到载玻片上，另一个就是把刚贴好切片的载玻片晾干。所以漂片机实际上就是个功能略复杂一些的水浴锅，除了可以把水加热，还可以盛放贴了切片的载玻片顺便烘干切片；
2、由于切下来的薄层石蜡就像狗皮膏药，非常容易黏在物体表面（你能想象的所有物体），并且黏上了就很难抠下来，所以事先要在切片机下面的台面上铺一层保鲜膜，这样掉下来的石蜡都落在保鲜膜上，便于清理；
3、漂片的时候由于各种原因，会在水面上留下不少石蜡，这些石蜡也需要用保鲜膜黏走，所以在漂片机的水浴边上也得搭上一片保鲜膜用于清理；
4、准备好切片需要的工具，包括刀片（刀片是消耗品且比较贵）、眼科镊（弯头、直头皆可）、毛笔（清扫用）、卷纸、防脱玻片、铅笔。
漂片机
好了，等漂片机热乎乎的，可以开始切了。先把蜡块从冰箱里拿出来，夹到切片机上。夹蜡块的时候蜡块摆放的方向可以有两种选择，或横夹或竖夹，
1、刀片的长度约10cm，切片过程中可能会卷刃（刀片卷刃会刮破标本），但是卷也只是某一个点会卷，别的地方都是好的，这时候选择竖夹有可能避开卷刃处；
2、有的标本比较狭长，如果竖夹会导致标本通过刀片的时间比较长（时间越长，标本被破坏的可能性越大），这时如果选择横夹可以较快地切出切片，尽可能保证标本完好。
夹好蜡块以后，挑一个用过很多次的、不是很新的、就算不那么锋利也可以的刀片，先夹到刀片夹上，用来“修片”。这里给大家解释一下为什么要“修片”。做好的石蜡块表面不是光滑的，并且组织外表面是有相当一部分石蜡遮挡的，所以一刀下去肯定是不能立刻切到组织的，就算一刀下去能切到组织，也不一定能切到你想要的部位或大小或形状或……，总之，第一刀或前几刀都不会让你满意，所以需要“预先”切几刀，把表面那些不是你想要的东西切走，这就叫“修片”。那么有小伙伴要问了，是不是以前切过的蜡块再拿过来切就不需要修了呢？答案是：同样需要。原因是以前切过的切面，放到现在你使用的这个切片机上，很可能不平行于刀片（肉眼很难看出来，一切就知道），也就导致蜡块夹好以后，开始切的前几张切片不会是完整的，所以也要“修片”。修完片子，换上崭新的刀片（就算不崭新，用过一次两次的也行，够锋利就可以），把切片厚度调到3μm），注意下一个动作，用嘴对着石蜡块哈一口气，不哈一口气的切片是没有灵魂的。下面就摇动手柄，让切片飞起来。切的过程只有一个注意点，那就是“快”，切慢了就等着裂吧。切的过程中如果裂了，就哈气，如果有划痕就换个方向夹蜡块或换刀片，请记得不管换什么，都要从修片开始。
切片
切到不少满意的片子就可以进行“漂片”了。用眼科镊挑选合适的切片铺到水上，这时要耐心等待一个节点，就是组织周围包裹的石蜡将化没化之时（说白了就是原本规则的正方形石蜡片变得有点不规则时），用载玻片从水下把切片捞上来，捞的时候切片也就贴在载玻片上了），载玻片记得提前用铅笔在磨毛的部位标记切片分组。贴好的载玻片放在晾干架上烘干，石蜡切片就完成啦，切下来的片子可以放在染色架上（就是个小吊篮），方便存取。
染色架
石蜡切片的做法讲完了，下一讲咱们继续说说冰冻切片的做法。
做冰冻切片的组织，固定后需要脱水（啊奥）。一般采用的方法是蔗糖梯度脱水，从低浓度到高浓度依次脱水，做法也很简单，就是用蔗糖配成相应浓度（一般是10%，20%，30%三个浓度）的溶液放到密封的容器里，然后把组织丢进去泡着。泡完一个浓度的蔗糖泡下一个浓度，浓度递增。详细做法童鞋们百度看看。脱完水以后可以放-80℃保存很久很久很久。
1、关于卷刃，有些聪明的小伙伴可能要说了，刀片有10cm，把卷刃的地方挪开不就行了吗？然而事实上是最好不要，不然很可能有血光之灾。因为有些刀片夹与刀片等长，如果挪刀片，那就意味着有一节刀片是凸在外面的，刀片十分锋利，很有可能切到人肉。事实证明，就算规规矩矩把刀片安装在刀片夹上，也是有可能切到手的，因为刀片是赤裸裸地暴露的。不过现在的切片机有些已经注意到这个问题，把刀片夹做的比刀片长很多，不过大家还是小心为上，总不能为了切个片把命都搭上吧。
2、石蜡切片一般切3μm厚，如果有特殊要求，可以自行调整。正是因为切片只有3μm厚，所以如果童鞋们想要观察多个不同部位的情况，请避免选择连续的切片，因为连续的切片上你观察到的结果没有太大差别。当然有些情况恰恰是需要观察连续切片的，那就另当别论了。现在就带来了一个问题，如果不连续选片，那应该间隔几张切片选择呢？这个问题的答案需要具体情况具体分析。举个例子，如果你想观察的是组织里某种细胞内的情况，那么两张切片之间的距离至少相差一个细胞的直径，这样你才能看到下一个细胞的情况。顺便说一下修片的厚度，由于修片目的只是获得一个理想的平面，所以可以大刀阔斧，七八九十微米都没什么问题。
3、其实哈气是避免组织裂开，这跟前面提到的把组织放冰箱是一个目的。石蜡块在处理的过程中经固定、脱水，组织变得比较干脆（本侠想说的是既干又脆），导致切片的时候很容易裂开。如果这时候在上面蒙上一层水汽，情况会好很多。所以常温保存的蜡块要提前放冰箱预冷，切之前也要哈一口气。
4、漂片的这个时间节点为什么要这么选呢？我们切下来的片子，中间是组织，周围是石蜡，能牢牢黏在载玻片上的是石蜡而不是组织，即使是防脱玻片，对组织的吸附力也并不是很强，所以石蜡不仅仅能方便切片，同样也有助于贴片。但是常温的石蜡片作为固体，贴在载玻片上并不服帖，所以通过加热的方法，让石蜡稍稍融化，这样就能让切片紧紧地贴在载玻片上了。但是如果加热时间太长，石蜡融化过度，石蜡就散了，组织会与石蜡脱离，那石蜡也就失去存在的意义了。所以时间节点的把握很重要。